биотехнология для чайников фитокамера для растительных культур, фотография любезно предоставлена Н.В. Пликиной
биотехнология составы и приготовление питательных сред культивирование клеток тесты по биотехнологии

Питательные среды для микроорганизмов и их приготовление

1. Приготовление бобового агара
В 1 литре воды кипятят 100 г белой фасоли или белых бобов до готовности, избегая растрескивания бобов и превращения крахмала в клейстер. Отвар фильтруют в горячем виде и добавляют 2% агара. Стерилизуют в автоклаве как обычно.
2. Приготовление среды для хлореллы
В качестве среды для культивирования зеленых водорослей можно использовать раствор Кнопа (г/литр раствора):
Ca(NO3)2 - 0.25
MgSO4*7H2O - 0.06
KH2PO4 - 0.06
KCl - 0.08
Fe2Cl6 - одна капля 1% раствора (можно заменить раствором хелатного железа из среды МС, 50 мл маточного раствора).
На растворе Кнопа можно также выращивать и ряску. 
3. Приготовление среды для цианобактерий
Для культивирования цианобактерий рекомендуется среда Чу N 10 (г/литр раствора):
Ca(NO3)2 - 0.04
MgSO4*7H2O - 0.025
KH2PO4 - 0.01
Na2CO3 - 0.02
Na2SiO3*9H2O - 0.025
FeCl3*6Н2О - 0.0008 (также можно заменить хелатом железа)
4. Приготовление питательного агара для грибов (агар Чапека)
Состав среды Чапека (г/литр раствора):
Сахароза - 30 г
NaNO3 - 3 г
KH2PO4 - 1 г
MgSO4 * 7H2О - 0.5 г
KCl - 0.5 г
FeSO4* 7H2O - 0.01 г
Агар-агар 15 г
На дно колбы насыпать агар (можно брать поллитровые обычные бутылки, тогда на 1 литр среды необходимы 3 бутылки, в каждую их которых насыпать 1/3 агара, т.е. 5 грамм) и залить раствором солей. Колбу или бутылки поставить в автоклав на стерилизацию на 20 минут. После стерилизации, покачивая колбу, тщательно перемешать содержимое, иначе агар останется на дне, и застынет только нижний слой среды.
В боксе среду разлить по стерильным чашкам Петри или пробиркам. Проверить на бактериальное заражение, выдержав 3-4 дня при комнатной температуре. В дальнейшем лучше хранить в холодильнике, так как там среда меньше испаряется.
5. Среда Прата для хранения коллекции культур водорослей
Длительно выдерживать зеленые водоросли без пересева не рекомендуется, так как водоросли могут прекратить свой рост в результате самоотравления продуктами жизнедеятельности. Признаками такого угнетения могут служить пожелтение культуры, появление белесого оттенка на среде и ее помутнение. Сохранить коллекцию водорослей можно на твердых питательных средах, где рост культуры замедлен, поэтому частые пересевы не требуются (раз в месяц, а если хранить при слабом рассеянном свете при температуре 10-15оС, то и раз в два месяца).
Состав среды Прата (г/литр раствора):
КNO3 - 0.10
MgSO4*7H2O - 0.01
K2HPO4 - 0.01
FeCl3*6Н2О - 0.001
агар-агар - 12 г
Среду простерилизовать.



отправить письмо © Н.А. Кузьмина 2006-2009