Питательные среды для растительных биотехнологических объектов
Успех в культивировании объектов зависит от правильного выбора питательной среды и тщательности её приготовления. В состав питательных сред входят
макро- и микроэлементы (N, P, K, Ca, S, Mg, Fe, B, Zn, Cu, Co, Mn, J, Mo);
витамины В
1, В
6, В
12, РР и другие;
углеводы (сахароза, глюкоза, маннит);
фитогормоны (чаще всего
цитокинины и
ауксины в определенном соотношении). Ауксины вызывают клеточную дедифференцировку, цитокинины индуцируют деление дедифференцированных клеток и необходимы для получения каллусных тканей.
На средах без гормонов растут “привыкшие” и опухолевые ткани.
Для получения стеблевого морфогенеза снижают содержание ауксинов.
Из ауксинов чаще всего применяют 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту (2,4-Д) - 0.1-10 мг/л, нафтилуксусную кислоту (НУК) - 0.1-2 мг/л, ИУК - 1-30 мг/л.
Для индукции каллусогенеза используют более высокие концентрации ауксинов, в дальнейшем ткань может расти при более низком содержании ауксинов.
В качестве цитокининов используют кинетин, 6-бензиламинопурин (БАП), зеатин (0.001-10 мг/л); из них кинетин наименее активен. В состав некоторых сред входит аденин. Иногда используют гибберелловую кислоту (ГК). В качестве ростактиваторов применяют также кокосовое молоко, дрожжевой экстракт, гидролизат казеина и др.
Состав питательных сред для культивирования биотехнологических объектов зависит от типа их питания:
- среда без глюкозы - для хлореллы, цианобактерий;
- среда без витаминов и гормонов - для грибов (фузариума, ботритиса) и для ряски (Lemna);
- среда с азотом, сахарами, витаминами и гормонами - для культивирования клеток и тканей высших растений.
Разработано много питательных сред, но большинство из них представляют модификации основных: Мурасиге-Скуга (МС), Уайта, Шенка-Хильдебрандта, Гамборга (В5), Линсмайера-Скуга, Хеллера, Чапека и др. Составы
питательных сред, получивших наибольшее распространение приведены в справочниках по физиологии растений и биотехнологии.
На сайте вы найдете прописи для базовых сред для культивирования растительных
клеток:
среда Мурасиге-Скуга и
среда Гамборга, некоторые
микробиологические среды.